一、 业务（产品）名称：CHO细胞表达系统

二、 服务（产品）内容概述：

哺乳动物细胞表达系统能够为重组人源蛋白提供较接近于天然状态的翻译后修饰，在蛋白表达过程中会形成接近天然蛋白的蛋白质折叠和聚合，具备活性蛋白所必须的空间结构和修饰。由哺乳动物细胞翻译后再加工修饰产生的外源蛋白质，在活性方面高于原核表达系统及酵母、昆虫细胞等真核表达系统，更接近于天然蛋白质。这一特性使得哺乳动物细胞表达系统在重组蛋白药物，特别是治疗性重组单抗药物的研发和生产中的应用。滨会生物建立了成熟的哺乳动物蛋白表达系统及纯化服务平台，提供哺乳动物蛋白表达系统的表达与纯化服务。

瑞铭达医药的哺乳动物细胞蛋白表达技术团队拥有丰富的CHO及HEK293细胞表达经验，同时可以提供标签切除、去除内毒素、无血清悬浮培养等多种特殊要求，为客户提供服务。

三、 服务（工艺）路线（图文并茂）：

四、 典型数据或结果展示：

生物反应器培养CHO-K1稳转细胞株表达PF-D（重组新冠病毒S蛋白三聚体），细胞浓度和活率图如下：

细胞浓度最高可达到1.17×107/ml，且细胞成活率一直维持在95%以上，培养至第14d，下罐。

通过WB初步判断生物反应器培养至第13d时，蛋白表达量每升可达到500mg。

五、 核心优势或特色

真核细胞中CHO-K1细胞是目前重组糖基蛋白生产的首选体系，因为与其他表达系统相比，它具有许多优点：

①具有准确的转录后修饰功能，表达的糖基化药物蛋白在分子结构、理化特性和生物学功能方面最接近于天然蛋白分子；

②具有产物胞外分越功能，便于下游产物分离纯化；

③具有重组基因的高效扩增和表达能力；

④具有贴壁生长特性，且有较高的耐受剪切力和渗透压能力，可以进行悬浮培养，表达水平较高；

⑤CHO细胞属于成纤维细胞，很少分泌自身的内源蛋白，便于下游产物分离纯化；

⑥能以悬浮培养方式或在无血清培养基中达到高密度培养，且培养体积能达到50~100L以上，可以大规模生产。

六、 项目（产品）经验

瞬时转染：可在短期内获得一定量的可溶性蛋白，可用于基因产物的快速表达和蛋白的小规模制备。

流程：目的基因序列设计与合成→目的基因构建到表达载体→瞬转表达→重组蛋白纯化→QC检测和发货

表达类型：常规单抗，蛋白等       交付量：100μg~10mg

宿主细胞：HEK293/CHO           QC检测：SDS-PAGE>95%

稳定转染：稳定高产，可用于工业生产

流程：目的基因序列设计与合成→目的基因构建到表达载体→电转→单克隆稳转细胞系的筛选→表达评估及检测→放大、重组蛋白纯化→QC&发货